【造模机制】 多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是育龄期妇女最常见的生殖内分泌紊乱性疾病,是引起无排卵性不孕的主要原因,发病率占生育期妇女的5%~21%,由于雄激素过多已被公认为PCOS的基本特征之一,所以采用注射外源性雄激素—硫酸普拉睾酮钠[脱氢表雄酮(DHEA)的硫酸钠盐制剂]进行大鼠PCOS的模型建立。 【造模方法】 21日龄未成年雌性SD大鼠,注射用硫酸普拉睾酮钠(扬州奥赛康药业有限公司),注射用水,血清睾酮(T)、雌二醇(E₂)、黄体酮(P)、催乳素(PRL)检测试剂盒(美国Bayer 诊断公司)。模型鼠于21日龄断乳,喂以颗粒饲料,自由饮水,适应性喂养2天。第23 日开始每日皮下注射硫酸普拉睾酮钠9mg/100g(相当于DHEA6mg/100g)+0.4ml注射用水,连续20天,以建立PCOS大鼠模型。大鼠于注药后21日晨用6%水合氯醛麻醉,摘取双侧卵巢,在解剖显微镜下去除卵巢表面脂肪组织,称重,分别用4%多聚甲醛固定作光镜HE 染色及2.5%戊二醛固定作透视电镜检查。于注药后21日晨取大鼠下腔静脉血,3000r/min,离心3分钟,收集血清,-20℃保存。采用化学免疫发光法检测血清中T、E₂、P、PRL含量。 【模型特点】 1.卵巢体积偏大,表面苍白,可见较多囊性扩张的卵泡,重量明显高于正常卵巢。 2.光镜HE 染色观察,卵巢切面沿包膜下见较多大小基本一致的囊性扩张的卵泡,卵泡内卵母细胞或放射冠消失,颗粒细胞排列松散,颗粒细胞层变薄至2~3层甚至消失,卵泡膜细胞增生,较少有黄体形成。 3.透视电镜观察,卵巢颗粒细胞层数减少,细胞器数量及细胞内脂滴减少,颗粒细胞形态变形,呈梭形变,细胞核核形不整,核内染色质浓集。细胞间纤维增生,线粒体肿胀,线粒体嵴断裂甚至消失。卵泡膜细胞层数增多,细胞内可见到脂滴。 4.血清T浓度非常显著性增高,血清E₂浓度显著性增高。 文章转载于北京吉田生物科技有限公司可承接动物实验外包
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